TSQ鋅離子熒光探針（藍色熒光）

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Zinquin ethyl ester；TSQ；FluoZin™-3；Zinc indicator鋅離子指示劑；CAS：109628-27-5；

訂貨信息： 

背景需求：

鋅（Zinc, Zn）是體內第二豐富的過渡金屬，是非常必要的催化、結構和調控離子。鋅離子（Zn2+）參與穩(wěn)態(tài)、免疫反應、氧化應激、凋亡和衰老等生理過程。鋅被指出能用作突觸前神經元的一種保守型神經遞質，以及用作一種跨膜信號貫穿突觸前神經元。異常的鋅代謝與許多神經性疾病有關聯(lián)，包括阿爾茨海默病，帕金森病和癲癇（epilepsy）。熒光成像被證明是的體內鋅離子監(jiān)測技術。

產品描述：

TSQ（N-(6-Methoxy-8-Quinolyl)-p-Toluenesulfonamide, CAS NO. 109628-27-5），是一種細胞膜滲透性的鋅離子（Zn2+）熒光探針，在含生理濃度的Ca2+和Mg2+體系內選擇性結合Zn2+。一旦與Zn2+（0.01-10µM）結合，TSQ熒光明顯加強，且熒光發(fā)射波長不變。TSQ普遍用于海馬苔蘚纖維的Zn2+研究。也能用來監(jiān)測凋亡相關的胞內Zn2+流量變化。

產品特性：

1） CAS NO.：109628-27-5

2） 同義名：Benzenesulfonamide, N-(6-methoxy-8-quinolinyl)-4-methyl; 6-Methoxy-8-p-toluenesulfonamido- quinoline; N-(6-Methoxy-8-quinolinyl)-4-methylbenzenesulfonamide; N-(6-甲氧基-8-喹啉基)-p-對甲苯磺酰胺;

3） 分子式：C17H16N2O3S

4） 分子量：328.4

5） Ex/Em：344/385nm

6） 外觀：固體

7） 溶解性：溶于DMSO（≥50mM）、甲醇 

8） 純度：≥98% (HPLC)

9） 化學結構式：

保存與運輸方法

保存：+4oC避光干燥保存，至少1年有效；-20oC避光干燥保存，至少2年有效。

運輸：室溫運輸。

注意事項

1） 關于化合物溶解性：產品特性內的“≥"表明溶于標示濃度，但飽和溶解度未知。不同批次化合物的溶解度會有差異。

2） TSQ的熒光對溶劑極性非常敏感。在水性緩沖液中Em= 495 nm (pH, 7.4)。與Zn2+(0.01–10 µM)結合后，熒光增強，但發(fā)射波長未發(fā)生變化【文獻來源：PubMed ID:8582235】。

3） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 儲存液的制備

將低溫保存的TSQ（固體），置于室溫回溫至少30min。低速離心后，于超凈臺內打開蓋子，往內加入適量高質量無水DMSO，配制成10-100mM的儲存液。一般情況下，為了避免染色體系中有機溶劑（如：DMSO）殘留可能引起的細胞毒性，在確保探針完quan溶解的前提下，儲存液的濃度至少是工作濃度的1000×。

2. 工作液的制備

于實驗前，用合適的生理緩沖液（比如：HHBS，HBSS）或無血清培養(yǎng)基稀釋儲存液到所需的工作濃度。工作液現(xiàn)配現(xiàn)用！

3. 染色步驟（培養(yǎng)細胞）

染色示例（來自文獻，僅做參考）

Ref 1）Kiyohara ACP, Torres DJ, Hagiwara A, Pak J, Rueli RHLH, Shuttleworth CWR and Bellinger FP (2021) Selenoprotein P Regulates Synaptic Zinc and Reduces Tau Phosphorylation. Front. Nutr. 8:683154. doi: 10.3389/fnut.2021.683154

實驗步驟：

j大腦兩半球的連續(xù)冠狀冷凍切片（10 μm）盛放在帶正電荷的顯微鏡載玻片上；

k 將切片浸潤于含4.5μM TSQ的染色液（稀釋于：140 mM sodium barbital and 140 mM sodium acetate buffer (pH 10)）內染色90s，之后用0.1% NaCl清洗；

l 用DAPI濾片來對染色切片成像觀察；

染色圖片：

Figure 2. Increased hippocampal zinc in SELENOP1 KO mice. (A) Neo-Timm's (Danscher) stain. Free Zn2+ in wildtype and SELENOP1?/? hippocampal neurons from mice injected with sodium selenite is revealed as a reddish-brown to dark brown color relative to the amount of total Zn2+. (B) Representative images from male and female WT and SELENOP1?/? mouse hippocampus, labeled with the fluorescent Zn2+ indicator, TSQ. (C) Quantitation of TSQ fluorescent label indicates higher Zn2+ levels in SELENOP1?/? animals in all observed regions except for hilar region. The average values for each region were normalized to wild type males. N = 6 animals/group, 5–10 slices/animal. Statistical analysis is performed by Student's unpaired t- test or two-way ANOVA with Bonferroni's post-hoc test. *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001.

Ref2）Cai J, Zhang Z, Zhou Z, Yang W, Liu Y, Mei F, Zhou G, Wang L. Localization of BEN1-LIKE protein and nuclear degradation during development of metaphloem sieve elements in Triticum aestivum L. Acta Biol Hung. 2015 Mar;66(1):66-79. doi: 10.1556/ABiol.66.2015.1.6. PMID: 25740439.

實驗步驟：

j用冷凍切片機制備10 μm切片；

k用TSQ鋅離子探針（10 μM）于25℃染5min，之后用ddH2O清洗兩次，每次5min；

l 用熒光顯微鏡觀察切片，用UV紫外激發(fā)（360~380nm）。對照組用ddH2O替代TSQ染色液。

染色圖片：

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