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Anaspec SensoLyte pNPP ALP Assay Kit 堿性磷酸酶活性檢測(cè)

Anaspec SensoLyte pNPP ALP Assay Kit 堿性磷酸酶活性檢測(cè)

簡(jiǎn)要描述:

Anaspec SensoLyte pNPP ALP Assay Kit 堿性磷酸酶活性檢測(cè):對(duì)硝基苯酚磷酸鹽(pNPP)是一種常用的堿性磷酸酶(ALP)顯色底物,堿性條件下能被ALP催化生成對(duì)硝基酚(para-nitrophenol,p-nitrophenol),呈黃色產(chǎn)物,可在400-415nm檢測(cè)到吸光度。產(chǎn)物黃色越深,代表ALP活性越高,反之則酶活性越低。則通過(guò)比色分析可定量檢測(cè)ALP水平

產(chǎn)品時(shí)間:2016-12-11

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 Alkaline Phosphatase Assay Kit 

堿性磷酸酶活性檢測(cè)試劑盒(顯色法)


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 產(chǎn)品關(guān)鍵詞:

Phosphatase, Alkaline堿性磷酸酶;ALP/AKP;對(duì)硝基苯酚磷酸鹽(pNPP);偶氮偶聯(lián)法;顯色法(定量);染色法(定性); 

 

基本介紹:

堿性磷酸酶(Phosphatase, Alkaline,ALP/AP/AKP/ALKP/ALPase,EC 3.1.3.1),是一種含兩個(gè)相同亞基的二聚體,也是一種約含12%碳水化合物(6%己糖和6%其他中性糖)的糖蛋白,每個(gè)ALP分子含4個(gè)鋅離子和4個(gè)二硫鍵。鎂離子存在情況下,ALP可達(dá)到zui高酶活。堿性條件下,ALP能催化磷酸單酯水解,比如對(duì)硝基苯酚磷酸鹽(pNPP)、磷酸苯酯、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-1-磷酸、果糖-6-磷酸、腺苷-5-磷酸等。

? 常見的堿性磷酸酶ALP包括腸道堿性磷酸酶(如小牛腸來(lái)源,calf intestinal)、胎盤堿性磷酸酶(placental alkaline phosphatase)、非組織特異性堿性磷酸酶(tissue-nonspecific isozyme, alkaline phosphatase)等。

ALP常用來(lái)偶聯(lián)抗體和其他蛋白,從而滿足ELISA、WB和組織化學(xué)檢測(cè)上的應(yīng)用。通常用來(lái)蛋白的去磷酸化實(shí)驗(yàn),比如酪蛋白和核酸等。當(dāng)需要高檢測(cè)靈敏度時(shí)也能用來(lái)蛋白標(biāo)記。還可用在DNA或RNA 的5′-末端去磷酸以防止自連。經(jīng)堿性磷酸酶的去磷酸化作用后,DNA 或 RNA 還可被放射性標(biāo)記磷酸鹽標(biāo)記(通過(guò) T4 多核苷酸激酶)。

 

研究意義:
堿性磷酸酶(ALP)活性的變化與一系列生理和病理事件緊密關(guān)聯(lián),比如骨骼發(fā)育、骨骼相關(guān)疾病、ren娠相關(guān)疾病和炎癥性腸病(inflammatory bowel diseases)等。正因如此,ALP被用作衡量生理特征或疾病的參照指標(biāo)。另外,ALP活性檢測(cè)在環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品質(zhì)量控制等方面也呈現(xiàn)重要作用。? 干細(xì)胞如誘導(dǎo)多潛能干細(xì)胞iPS,ALP活性很高,則ALP常被用作iPS誘導(dǎo)成功的標(biāo)志;? 分化的結(jié)腸癌細(xì)胞內(nèi)ALP活性顯著提高,則ALP常被當(dāng)做結(jié)腸癌細(xì)胞分化程度的指標(biāo)(定性/定量);? 血清中ALP水平提高,被稱作高堿性磷酸酶血癥,此癥狀被認(rèn)為和惡性膽管阻塞、原發(fā)性膽管硬化、原發(fā)性硬化膽管炎、肝淋巴瘤和肝肉瘤等肝膽疾病密切相關(guān);? ALP是成骨細(xì)胞的副產(chǎn)物,血清中ALP活性升高和骨頭發(fā)育密切關(guān)聯(lián);? 血清ALP活性過(guò)低也與一些疾病相關(guān);? 兒童和孕婦血清內(nèi)ALP活性較常人高一些;血清中ALP活性范圍在20-140U/L。

檢測(cè)原理(堿性磷酸酶活性):

對(duì)硝基苯酚磷酸鹽(pNPP)是一種常用的堿性磷酸酶(ALP)顯色底物,堿性條件下能被ALP催化生成對(duì)硝基酚(para-nitrophenol,p-nitrophenol),呈黃色產(chǎn)物,可在400-415nm檢測(cè)到吸光度。產(chǎn)物黃色越深,代表ALP活性越高,反之則酶活性越低。則通過(guò)比色分析可定量檢測(cè)ALP水平。反應(yīng)式如下:



檢測(cè)對(duì)象:細(xì)胞或組織裂解液或勻漿液、血清、血漿、尿液等樣品內(nèi)源性堿性磷酸酶活性。
 

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Anaspec

SensoLyte® pNPP Alkaline Phosphatase Assay Kit *Colorimetric*

AS-72146500 assays2422


試劑盒組分:

ComponentDescriptionQuantity

Component A

pNPP, colorimetric alkaline phosphatase substrate

25 mL

Component B

10X Assay buffer  

50 mL

Component C

Stop solution

25 mL

Component D

Triton-X-100500μl 

Component E

Alkaline Phosphatase Standard, Calf Intestine

10μg /mL, 50μl 

   AS-72146 SensoLyte pNPP Alkaline Phosphatase Assay Kit.pdf
 

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MKbio

Alkaline Phosphatase Assay Kit (Colorimetric) 堿性磷酸酶檢測(cè)試劑盒(顯色法)

MP7501-100T100T495

 

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

 

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