核酸凝膠染料
簡要描述：
核酸凝膠染料適用范圍廣：可選擇電泳前染色（膠染法）或電泳后染色（泡染法）；適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳；可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。
產品時間：2024-03-21
打印當前頁MKRed（效果同GelRed）核酸染料（10,000× 水溶液）
MKRed核酸凝膠染料特點
● 無毒性：MKRed *的油性和大分子量特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內，艾姆斯氏試驗結果也表明，該染料的誘變性遠遠小于EB。
● 靈敏度高：適用于各種大小片段的電泳染色，對核酸遷移的影響小于SYBR Green I。
● 穩定性高： 適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠；室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩定，耐光性強。
● 信噪比高：樣品熒光信號強，背景信號低。
● 操作簡單：與 EB 一樣，在預制膠和電泳過程中染料不降解；而電泳后染色過程也只需30 分鐘且無需脫色或沖洗 ，即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。
● 與EB有相同的光譜特性，無需改變濾光片及觀察裝置：標準的 EB 濾光片或 SYBR 濾光片都適用，使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可，在 300nm 紫外光附近可得到zui好激發。但是MKRed不能被488 nm氬離子激光器或相似波長的可見光*激發，因此不推薦使用此類激發裝置的成像系統。對于此類裝置，我們推薦您使用DuGreen（Cat# 011或012），它和SYBR Green I的光譜相似，靈敏度相當，但更加穩定。
核酸凝膠染料使用方法簡介
1．膠染法（用法同EB）（推薦方法）
（1） 制膠時加入MKRed 核酸染料（例如：每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL MKRed 10,000× 儲液，
以此比例類推）。
（2） 按照常規方法進行電泳。
注意事項：
♦ 此方法染色染料用量相對較少。500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。
♦ 由于MKRed具有良好的熱穩定性，可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷卻。搖晃，振蕩或者翻轉以保證染料充分混勻。也可以選擇將MKRed儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中，然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。MKRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
♦ 如果總是看到條帶彌散或分離不理想，建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色后問題依舊存在，則說明問題與染料無關，請嘗試：降低瓊脂糖濃度；選用更長的凝膠；延長凝膠時間以保證邊緣清晰；改進上樣技巧或選擇泡染法染色。
♦ 此方法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠，對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
2．泡染法
（1） 按照常規方法進行電泳。
（2） 用H2O將MKRed 10,000× 儲液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中，制成3× 染色液。（例如將15μL MKRed 10,000× 儲液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中）。
（3） 將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右，zui合適染色時間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含3.5～10％丙烯酰胺的凝膠，染色時間通常介于30min到1h，并隨丙烯酰胺含量增加而延長。
注意事項：
♦ 用泡染法染色時，染料用量較多。單次使用的染色液可重復使用3次左右。
♦ 3× MKRed染色液可以大量制備，在室溫下避光保存直至用完。
幾種核酸染料比較
名稱 | 靈敏度 | 穩定性 | 對DNA 遷移的影響 | 安全性 | 適用性 |
MKRed | 高 | 高 | 條帶不彎曲，DNA片段不遷移 |
| 通用大小片段電泳染色，與EB有相同的光譜特性，無需改變濾光片及觀察裝置。標準的EB濾光片或SYBR濾光片都適用，使用普通紫外凝膠透射儀觀察即可，在300nm紫外光附近可得到zui好激發。 |
MKGreen | 高 | 高 | 條帶不彎曲，DNA片段不遷移 | ① 是一種*的油性大分子，不易揮發升華，不易吸入人體，不能穿透細胞膜進入活體細胞內，安全無毒。 | 通用大小片段電泳染色，適用于使用254nm激發的紫外凝膠透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。 |
SYBR Green I | 高 | 低 | 染料濃度較高時，條帶容易彎曲，DNA片段遷移的現象明顯 | 屬花箐染料，能透過細胞膜進入活體細胞內，但容易生物降解，不會在體內殘留，安全無毒。 | 100bp以上電泳染色，適用于使用254nm激發的紫外凝膠透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。 |
EB | 低 | 高 | 條帶不彎曲，DNA片段不遷移 | ① 分子量小，易揮發升華，易吸入人體，不易生物降解，在體內長期殘留。 | 100bp以上電泳染色，背景熒光信號高；使用普通紫外凝膠透射儀觀察。 |
Goldview | 低 | 高 | 條帶不彎曲，DNA片段不遷移 | ① 主要成分為吖啶橙，是一種煤焦油提取物，具有高毒，致癌，高誘變性。 | 100bp以上電泳染色，背景熒光信號高；適用于使用254nm激發的紫外凝膠透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。 |
特別提醒：
♦ 如果您使用的是紫外成像儀，請選擇MKRed；如果您使用激光成像儀或希望在可見光下觀測，請選擇 MKGreen。
♦ 在極少數情況下，質粒經某些酶切后的DNA樣品會出現拖尾和分辨率降低，此時建議同時嘗試兩種染色方法以決定哪種方法更加合適。
訂購信息：
品名 | 產地 | 貨號 | 規格 | 單價 | 備注 |
MKRed（10,000× 水溶液） | MKbio | MF0754-500UL | 500ul | 460 | 現貨 |